Гистологическая характеристика надпочечника крысы после воздействия хирургическим лазером

Научная библиотека Комментариев к записи Гистологическая характеристика надпочечника крысы после воздействия хирургическим лазером нет

Кемоклидзе К.Г., Тюмина Н.А. // Фундаментальные исследования. – 2013. – № 8-4. – С. 886-891; УДК
611.018

Проведено гистологическое исследование надпочечника крысы непосредственно после воздействия хирургическим лазером с энергией 71,25 Дж (0 сутки) и спустя сутки после него (1 сутки). Выяснено, что в месте воздействия происходит испарение ткани надпочечника объёмом 0,27 ± 0,08 мм3 и образуется абляционная каверна. По мере удаления от неё возникают зона струпа (карбонизация и карамелизация), зона губчатого некроза (вапоризация) и зона внешне целых, но смертельно повреждённых клеток (тепловая фиксация, компактный некроз). Зона губчатого некроза состоит из двух слоёв, отличающихся по размерам вакуолей вапоризации и тинкториально. Глубина фототермического поражения достигает 1–2 мм. На 0 сутки отсутствует отчётливая граница между погибшими и выжившими клетками надпочечника и характерная для эндокриноцитов мозгового вещества хромаффинная реакция. В половине случаев к концу 1 суток отчётливая граница некроза проявляется, хромаффинная реакция восстанавливается, и как в толще, так и на периферии органа прибывают и активизируются клетки воспаления. В другой половине случаев клетки воспаления активны только на периферии органа и общая гистологическая картина сходна с таковой сразу после лазерного воздействия, что говорит о масштабном некрозе всего объёма органа и сохранении его в состоянии тепловой фиксации. Таким образом, применённая энергия лазерного воздействия вызывает выживание части паренхимы надпочечника или её полную гибель в соотношении 50/50, что говорит о том, что более высокая энергия вызовет гарантированную гибель паренхимы органа, а более низкая ‒ выживание её значительной части. Показано, что клетки одной и той же популяции могут обладать неодинаковой фототермической устойчивостью. В то же время избирательного действия лазера на какую-либо разновидность клеток надпочечника не обнаружено.

HISTOLOGICAL CHARACTERISTICS OF THE RAT ADRENAL GLAND AFTER SURGICAL LASER IMPACT
Kemoklidze K.G. 1 Tiumina N.A. 1
1 Yaroslavl State Medical Academy
Abstract:
We performed histological study of surgical laser with 71,25 J impact energy on rat adrenal gland immediately (day 0) and 1 day after manipulation. We found that tissue vaporized and ablation cavity appeared in the area of laser exposure. Distantly there were zones of scab (carbonization and caramelization), vaporization (spongy necrosis) and zones that looks like normal but consisted from fatally damaged cells (thermal fixation). The spongy necrosis zone consisted from two different in their size vacuoles and coloring layers. Photothermal lesion depth was 1–2 mm. At day 0, there was no demarcation between dead and surviving adrenal gland cells without cellular chromaffin reaction. At day 1 (in 50 % observations), the demarcation appeared and chromaffin reaction restored together with the appearance and activation of inflammatory cells both in the depth and periphery of the organ. In the second 50 % of observations, we discovered that inflammatory cells were active only on the periphery and general histological picture was the same to that of day 0 (sign of organ global thermal fixation). We concluded that applied laser energy has caused the partial survival of adrenal gland parenchyma or total cellular death (ratio of 50/50). More powerful laser energy will cause guaranteed death of adrenal gland parenchyma, whereas smaller energy will allow the survival of parenchyma significant part. This work indicated that the same cells of different populations may have the difference in their photothermal stability. However, we found no selective affection by laser impact of different types of adrenal gland cells.

В настоящее время сложилась ситуация, когда успешное и всё более широкое применение лазеров в клинической практике несколько опережает фундаментальные гистологические исследования реакции органов на лазерное повреждение, и она до сих пор считается недостаточно изученной [5]. Сказанное в полной мере относится к такому трудному для исследования, но важному объекту, как надпочечник, лечение лазером которого [1, 6] контрастирует с фактическим отсутствием сведений как о морфологии лазерной деструкции данного органа, так и о восстановительных процессах после неё.

Для сглаживания остроты указанной проблемы мы поставили цель изучить гистологическую картину состояния надпочечника непосредственно после воздействия хирургическим лазером и спустя сутки после него.

Материал и методы исследования

Объектом исследования послужили 14 лабораторных белых крыс-самцов линии Wistar массой 348 ± 30 г., у которых с помощью аппарата «Лами» лучом диодного лазера с энергией воздействия 71,25 Дж (длина волны 1020 нм, мощность излучения 2,5 Вт, световод диаметром 400 мкм, продолжительность импульса 190 мс, интервал 10 мс, количество импульсов 150) осуществлялась деструкция части левого надпочечника.

Непосредственно после воздействия и через 1 сутки производили забой крыс передозировкой паров эфира по 7 животных на срок.

Для дифференцировки в мозговом веществе надпочечника двух основных субпопуляций хромаффиноцитов – эпинефроцитов и норэпинефроцитов ‒ применяли метод Honore [7], согласно которому материал фиксировали в 5 % глутаровом альдегиде, заливали в парафин, а срезы окрашивали сочетанием бихромата калия и толуидинового синего. В результате норэпинефроциты окрашивались в зелёный, а эпинефроциты ‒ в серовато-фиолетовый цвет.

Измерения проводили с помощью окулярных линеек и сеток непосредственно на препаратах и по цифровым фотографиям с использованием программы Fiji (разновидность ImageJ), статистическую обработку осуществляли с помощью программ Универсальный гистологический счётчик [2] и Microsoft Exel.

Результаты исследований и их обсуждение

В указанные сроки обнаружена следующая гистологическая картина.

Непосредственно после воздействия. В точке приложения лазера с указанными параметрами происходит абляция тканей с образованием каверны объёмом 0,27 ± 0,08 мм3 (рис. 1). Края каверны выстланы струпом тёмно-коричневого цвета толщиной от 50 до 100 мкм (обугливание). По мере удаления от края повреждения струп светлеет до золотистого (карамелизация). Под струпом находится зона губчатой консистенции (вапоризация), в котором можно выделить два слоя – наружный и внутренний, резко различающиеся как структурно, так и, с поправкой на использованный метод окраски, тинкториально. Наружный слой является непосредственным продолжением струпа, имеет толщину от 80 до 150 мкм, слабо базофилен, окрашивается в бирюзовый цвет и содержит мелкие вакуоли диаметром до 20 мкм. Клетки в этой зоне полностью разрушены. Внутренний слой имеет толщину 300–400 мкм, интенсивно базофилен, окрашивается в синий цвет, содержит обширные пустотелые вакуоли диаметром до 350 мкм.

pic_52.tif

Рис. 1. Надпочечник крысы непосредственно после воздействия лазером:* – абляционная каверна. Фикс. глут. альдегидом, окр. по Honore. Об. ×4, фотонасадка ×27

Стенки вакуолей образованы вытянутыми, деформированными клетками с бледно окрашенной цитоплазмой и удлинёнными интенсивно окрашенными ядрами (рис. 2).

Чёткая граница между погибшими и выжившими клетками отсутствует (рис. 1). Клетки мозгового вещества слабо окрашены, хромаффинная реакция отсутствует, норэпинефроциты и эпинефроциты по окраске не дифференцируются. Нейроны мозгового вещества, напротив, сохраняют интенсивную базофильную окраску с характерными для них базофильными глыбками в цитоплазме, но в этой же локальной точке можно встретить и аномально хромофобные нейроны (рис. 3).

pic_53.tif

Рис. 2. Край абляционной каверны в надпочечнике крысы после воздействия лазером:I – струп; II – зона губчатого некроза (вапоризация); III – зона компактного некроза; 1 – обугливание; 2 – карамелизация; 3 – микровакуолярная зона; 4 – макровакуолярная зона. Фикс. глут. альдегидом, окр. по Honore. Об. ×10. фотонасадка ×27

pic_54.tif

Рис. 3. Мозговое вещество надпочечника крысы после воздействия лазером:1 – хромаффинноциты; 2 – нейроны. Фикс. глут. альд., окр. по Honore. Об. ×40, фотонасадка ×27

1 сутки. В половине случаев зона некроза резко просветляется и приобретает отчётливую границу. Измеренная по ней глубина лазерного поражения составляет 1–2 мм.

Полное содержание статьи: https://fundamental-research.ru/ru/article/view?id=32015

 

Рекомендуем для Вас

Leave a comment

You must be logged in to post a comment.


© Интернет журнал "ЛАЗЕРНЫЙ МИР", 2019
Напишите нам:
laser.rf.mail@yandex.ru

Back to Top